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    流感疫苗生產的純化過程和設備

    時間:2015年12月22日 信息來源:湘智離心機 字體: 打印此頁

    流感疫苗生產的純化過程:
    1. 已培養好的帶病毒的雞胚用75%酒精消毒;
    2. 收集雞胚尿囊液:根據雞蛋大小收集量略有不同(每只6-10ml);
    3. 尿囊液初濾JST型10μm濾芯過濾;
    4. 連續流離心機或超濾系統過濾 ;
    a. 連續流離心機:日立R13C,用12,000rpm,流量:每分鐘600-800ml,除去雜質,上清液用于透析濃縮;
    b. Millipore超濾系統,0.45μm濾膜,除去雜質 ;
    5. 尿囊液的透析濃縮:用Millipore超濾器,1000KD膜包濃縮,濃縮后通常為尿囊液量的1/30;
    6. 超速離心的病毒純化;
    7. 福爾馬林脫毒;
    8. 乙醚裂解;
    9. 100KD透析脫糖;
    10. 去福爾馬林;
    11. 去乙醚;
    12. 幾種流行病毒抗原的混合(如H1N1+H3N2+H2N2)和稀釋 ;
    13. 加入穩定劑 ;
    14. 成品 。

    離心純化需要準備的儀器和基本材料:
    1. 儀器
    a. 阿貝折射儀 Abbe refractometer (測蔗糖濃度)
    b. Cole parmer 軟管泵:KH-77913-25
    c. 紫外分光光度計或核酸蛋白分析儀(有280nm,260nm波長的),可以是帶流動池及記 錄儀,也可以是帶標準樣品池的)
    2. 梯度液
    a. PB緩沖液PH7.3
    b. 30% w/w蔗糖液(Sucrose,Sigma,AR級)
    c. 55% w/w蔗糖液
    d. 58% w/w蔗糖液
    3. 實驗器具
    a. 50ml有刻度玻璃管 100支
    b. 500ml有刻度燒杯 5支
    c. 100ml有刻度燒杯 5支
    d. 1000ml有刻度量筒 3只




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